不同发酵方式下醋酸产量随发酵时间的变化见图
2。由图 2 可知,发酵初期,由于发酵
液中醋酸菌含量较低,因此发酵产醋酸的速度比较慢;到发酵中期,由于发酵液中醋酸菌
大量繁殖且溶氧充足,发酵乙醇产醋酸的速度加快,醋酸产量迅速提高;到发酵后期,由
于发酵液中的乙醇被消耗完全,醋酸产量不再升高。采用静置发酵方式,发酵体系中的溶氧
量会随着发酵的进行逐渐被消耗,不能及时得到补充,因此醋酸产量上升较慢,发酵
48 h
后醋酸产量最高,之后随发酵时间的延长醋酸产量基本保持不变。采用摇床发酵方式,发酵
体系中的溶氧量能得到一定的补充,因此醋酸产量随发酵时间的延长上升速度较快,发酵
36 h 后醋酸产量即达到最大值,但醋酸属于易挥发物质,反应体系的振动导致发酵生成的
醋酸较易挥发,从而醋酸产量又不断降低。而循环喷淋发酵因发酵液与罐体内氧气充分接触
使得发酵体系中的溶氧量充足,发酵速率随发酵时间的延长迅速升高,发酵
24 h 醋酸产量
即达到最大(
1.159 g/100 mL),但之后由于发酵液和空气充分接触,产生的醋酸不断挥发,
醋酸含量又迅速下降。综合考虑,循环喷淋发酵可以提高醋酸菌发酵产醋酸的速度,大大缩
短发酵时间,但发酵时间过长易造成产生的醋酸挥发损失,因此操作时应注意严格控制发
酵时间。
2.2 单因素试验结果
2.2.1 菌床载体对循环喷淋发酵醋酸产量的影响 菌床载体对循环喷淋发酵工艺中醋酸产
量的影响结果见图
3。由图 3 可以看出,以玉米芯为发酵载体,发酵 24 h 就达到最大醋酸产
量(
1.679 g/100 mL),产酸速率明显高于刨花、稻壳和芦苇秆载体,最大醋酸产量显著高
于稻壳和芦苇秆,且发酵后期醋酸产量的下降趋势也较为平缓,因此后续试验选择玉米芯
作为菌床载体。
2.2.2 发酵温度对醋酸产量的影响 发酵温度对醋酸产量的影响结果见图 4。由图 4 可知,
醋酸产量随着发酵温度的升高呈先升高后降低的趋势,发酵温度为
36
℃时醋酸产量最高,
为
1.600 g/100 mL。温度过低会导致醋酸菌的活性降低,从而醋酸产量较低,但温度过高抑
制醋酸菌生长
[8],同时会导致发酵罐里乙醇氧化时放出的热量不能及时排出,不利于反应
向正方向进行,从而降低了醋酸产量。因此选择
32~36
℃为适宜的发酵温度范围。
2.2.3 发酵液中乙醇体积分数对醋酸产量的影响 发酵液中乙醇的体积分数对醋酸产量的影响
结果见图
5。由图 5 可知,醋酸产量随乙醇体积分数的升高呈先升高后下降的变化趋势,乙
醇体积分数为
8%时醋酸菌发酵最旺盛,醋酸产量达 1.695 g/100 mL。乙醇体积分数过低,
可被醋酸菌消耗的能源少,且反应底物的浓度过低,不利于醋酸的生成,而乙醇体积分数
过高时高渗透压对醋酸菌的生长有抑制作用
[9],初步确定 6%~8%为适宜的乙醇体积分数
范围。
2.2.4 接种量对醋酸产量的影响 接种量对醋酸产量的影响结果见图 6。由图 6 可知,醋
酸产量随着菌种接种量的增加先呈升高趋势,接种量为
55 g/L 时醋酸产量可达 1.72 g/100
mL,之后再增加接种量,醋酸产量基本保持不变,接种量过小,发酵体系中的醋酸菌繁殖
较慢,发酵产醋酸的速度慢,且易导致发酵液发酵不充分,当发酵体系中的醋酸菌达到一
定浓度时,在短时间内就可将乙醇消耗完全,再增加接种量,醋酸产量不再升高。因此试验
初步确定
35~75 g/L 为适宜的接种量范围。
2.2.5 发酵液流速对醋酸产量的影响 发酵液流速对醋酸产量的影响结果见图 7。由图 7
可知,醋酸产量随发酵液流速的加快呈上升趋势,但总的上升幅度不大。发酵液流速低,喷
淋出的液体与氧气接触面积有限,醋酸发酵效率低,当发酵液流速达到一定值后,反应体
系中的溶氧量已经满足反应所需的耗氧量,再加快发酵液流速,醋酸产量不再升高
[10]。因
此综合考虑,选择
2.7~6.3 L/min 为适宜的发酵液流速范围。
2.3 正交试验结果
以玉米芯为菌床载体、发酵时间
24 h,考察发酵液流速、发酵温度、接种量、乙醇体积分