浓度。结合供试品溶液的配制方法可知总三萜酸的得率计算公式为:
得率
=ρnm1 /10mm2 ×100%
式中
ρ 为供试品溶液中三萜酸的质量浓度(mg/mL);n 为稀释倍数;m 为枇杷叶干粉
的质量(
g),m1 为总粗三萜酸的质量(g),m2 为配制供试品溶液项下取得粗三萜酸的
质量(
g)。
1.2.3 单因素实验
按
1.2.1 项下提取工艺分别考察表面活性剂的种类和表面活性剂的质量浓度对三萜酸得
率的影响。
1.2.4 正交实验
在单因素实验结果的基础上,对吐温
60 的质量浓度、料液比、超声温度和提取时间这四
个因素分别设置三水平值。其四因素三水平表见表
1。再按 1.2.1 项下提取工艺根据 L9(34)
正交设计条件分别进行实验。
■
1.2.5 验证实验
对正交实验得出的最佳提取工艺进行验证,重复操作
3 次,取平均值。
2 结果与讨论
2.1 单因素实验结果
2.1.1 不同的表面活性剂对得率的影响结果 见表 2。
表
2 表面活性剂的种类对三萜酸得率的影响
■
从表
1 可知,表面活性剂的加入显著提高了枇杷叶总三萜酸的得率,其中增溶作用最
大的是吐温
60,故实验中的表面活性剂选择吐温 60 为增溶剂。
2.1.2 表面活性剂的质量浓度对得率的影响结果,见图 1。
图
1 吐温 60 的质量浓度对得率的影响
由图
2 可知,随着质量浓度的增加,总三萜酸的得率也在增大;当质量浓度大于
1.5%,三萜酸的得率反而下降,可能是因为随着表面活性剂浓度的增大,枇杷叶中其他杂
质成分的量相对三萜酸增加得更多,导致三萜酸的含量有所减少。故吐温
60 的质量浓度选
择
1.5%为宜。
2.2 正交实验结果 见表 3。
■
由 表
3 的 极 差 分 析 可 知 : 各 因 素 对 枇 杷 叶 总 三 萜 酸 得 率 的 影 响 顺 序 依 次 为
D>A>C>B,即超声提取时间对三萜酸得率影响最大,其次为吐温 60 的质量浓度、温度和料
液比,最佳提取工艺为
A1B3C1D2,即吐温 60 的质量浓度为 1%,料液比 1:25,温度为
50
℃,提取时间为 30min。
对正交试验得出的最佳工艺进行验证,重复提取三次,枇杷叶总三萜酸的平均得率为
12.17%。
3 结论
表面活性剂的应用显著提高了三萜酸的得率。利用表面活性剂协同超声提取枇杷叶中总
三萜酸的最佳工艺为:吐温
60 的质量浓度为 1%,料液比 1:25,温度为 50
℃,提取时间
为
30min,枇杷叶总三萜酸的得率为 12.17%。该工艺稳定、可靠,选用水作溶剂,具有无有
机溶剂残留、对环境无公害、提取效率高等优点。
参考文献:
[1] 康延国.中药鉴定学[M].中国中医药出版社,2009:278.
[2] 林 玉 霖 , 林 文 津 , 林 力 强 . 枇 杷 叶 的 研 究 现 状 与 开 发 前 景 [J]. 中 药 材 ,